Multiplex diagnostiek: snel, breed en betrouwbaar

“Multiplexe lichtgevende diagnostiek voor infectieziekten”

Methoden voor nucleïnezuurdetectie op basis van CRISPR en isothemische amplificatietechnieken bieden veelbelovende mogelijkheden voor point-of-care diagnostiek bij infectieziekten. Wij hebben het LUNAS (Luminescent Nucleic Acid Sensor) platform ontwikkeld, waarin doelwit-dsDNA sequentiespecifiek wordt gedetecteerd door een paar dCas9-gebaseerde sondes die gesplitste luciferasecomplementatie mogelijk maken. LUNAS is eenvoudig te combineren met recombinase polymerase amplificatie (RPA) en kan worden uitgelezen met een eenvoudige digitale camera.

Om multiplexdetectie mogelijk te maken, hebben we LUNAS-kleurvarianten ontwikkeld die twee ziekteverwekkers in één reactie kunnen detecteren en onderscheiden. Ter demonstratie hebben we een duplextest ontworpen voor N. gonorrhoeae en C. trachomatis, twee seksueel overdraagbare bacteriële infecties met vergelijkbare klinische symptomen. De nauwkeurigheid van deze test hebben we gevalideerd met patiëntmonsters, wat de potentie van deze methode aantoont voor snelle en betrouwbare multiplexdiagnostiek van infectieziekten.

Spreker: Yosta de Stigter, TU Eindhoven